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siRNA对体外培养大鼠海马神经元细胞红蛋白基因表达的抑制
【出 处】:
【作 者】:
【摘 要】【目的】研究siRNA(small interfering RNA)对细胞红蛋白(Cytoglobin,CYGB)基因表达的抑制作用。【方法】取新生大鼠海马做神经元原代培养,NeuN免疫荧光抗体鉴定神经元纯度后,通过阳离子脂质体转染试剂将体外化学合成的针对CYGB基因的siRNA转入细胞中,以未转入siRNA细胞及转入阴性siRNA细胞为对照,通过转染荧光对照siRNA检测转染效率,用RT-PCR方法检测siRNA对CYGB表达的抑制作用。【结果】成功体外培养海马神经元,转染荧光对照siRNA结果示转染效率在70%左右,RT-PCR结果提示与阴性对照及空白对照相比,转染siRNA-78后24 h(P〈0.01),48 h(P〈0.001)及60 h(P〈0.001)CYGB mRNA的表达明显减弱,72 h后表达无明显减少。而转染siR-NA-79,siRNA-80在各时间点与对照相比没有明显差别(P〉0.05)。【结论】特异性针对CYGB的siRNA-78转染体外培养的大鼠海马神经元24~60 h能显著下调CYGB基因的表达。